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以下是山羊低密度脂蛋白(LDL)ELISA試劑盒的綜合使用說明，整合自多個廠商的標準化操作流程：
BS-3859 山羊低密度脂蛋白(LDL)ELISA試劑盒 天津本生試劑盒
一、實驗原理
采用雙抗體夾心法：包被微孔板的捕獲抗體與樣本中LDL結合后，再與HRP標記的檢測抗體形成復合物，經TMB顯色后通過450nm吸光度定量。
二、試劑盒組成
典型配置包括：
酶標包被板(48T/96T)
標準品(濃度梯度通常為0-48ng/ml)
酶標試劑(HRP標記抗體)
顯色劑A/B液(TMB溶液)
終止液(酸性溶液)
20-30倍濃縮洗滌液
樣品稀釋液及封板膜
三、樣本處理要求
血清/血漿?：
采集后室溫靜置10-30分鐘，2000-3000g離心20分鐘取上清
避免溶血或反復凍融(建議分裝保存于-20℃)
組織勻漿?：
按1:9比例加入PBS勻漿，3000g離心10分鐘取上清
細胞上清?：
3000g離心10分鐘去除顆粒物
四、操作步驟
試劑準備?：
所有試劑需平衡至室溫(18-25℃)
濃縮洗滌液需用蒸餾水稀釋
加樣?：
每孔依次加入標準品/樣本50μL→酶標試劑50μL→37℃孵育60分鐘
洗滌?：
棄液后拍干，每孔加滿洗滌液靜置30秒，重復5次
顯色?：
加入顯色劑A/B各50μL，37℃避光反應15分鐘
終止與檢測?：
加終止液50μL，15分鐘內測定450nm OD值
五、注意事項
不同批次試劑不得混用
顯色劑B需避光保存
標準曲線需每次實驗重新制備
OD值>2.0時需稀釋樣本復測
精密度要求：批內CV<10%，批間CV<12%
六、結果計算
以標準品濃度為橫坐標，OD值為縱坐標繪制曲線，通過回歸方程計算樣本濃度。典型檢測范圍為0.17-4.2mmol/L。
注：以上資料僅供參考，具體操作參數請以實際試劑盒說明書為準，不同廠商可能存在細微差異。
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