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以下是關于人第八因子相關抗原(FⅧAg)ELISA試劑盒的實驗使用說明綜合指南：
BS-0195 人第八因子相關抗原(FⅧAg)ELISA試劑盒
一、實驗原理
采用雙抗體夾心法檢測樣本中FⅧAg含量。具體步驟為：
用純化抗體包被微孔板形成固相抗體
依次加入待測樣本和HRP標記抗體
形成抗體-抗原-酶標抗體復合物后，TMB顯色系統產生顏色反應
二、試劑盒組成
典型配置包含(不同品牌可能略有差異)：
酶標包被板(96T/48T)
FⅧAg標準品(通常含40μg/ml原液)
酶標試劑(HRP標記抗體)
顯色液(TMB A/B液)
終止液(酸性溶液)
20×濃縮洗滌緩沖液
三、樣本要求
適用樣本類型：人血清、血漿及相關液體樣本
保存要求：
新鮮樣本需立即檢測
凍結樣本應充分混勻后使用
避免反復凍融和細菌污染
四、操作步驟
標準品稀釋?：用標準品稀釋緩沖液進行梯度稀釋
加樣?：
每孔加入100μl標準品或樣本
37℃溫育90分鐘
洗滌?：棄液體后用洗滌液洗板5次
加酶標抗體?：每孔加100μl HRP標記抗體
顯色?：
加入TMB顯色液(A+B液等體積混合)
避光反應15-30分鐘
終止?：每孔加50μl終止液
檢測?：450nm波長讀取OD值
五、結果計算
以標準品濃度為橫坐標，OD值為縱坐標繪制標準曲線
通過回歸方程計算樣本濃度(需乘以稀釋倍數)
六、注意事項
試劑使用前需平衡至室溫(25-37℃)
嚴格避免：
不同批次試劑混用
顯色液接觸金屬器具
酶標板干燥
質量控制：
建議所有樣本做雙孔檢測
每板設置空白對照
安全防護：
避免直接接觸終止液和顯色液
禁止用嘴吸取試劑
七、儲存條件
未開封試劑盒應保存于2-8℃;開封后酶標板需密封保存并添加干燥劑。
(注：具體操作參數請以實際試劑盒說明書為準，不同廠家可能存在差異，以上資料僅供參考，具體請咨詢技術老師及供應商)。
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