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?微生物乙酰乙酰輔酶A(AA-CoA)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)使用說(shuō)明書(shū)可能包含以下內(nèi)容?：
BS-0029-WA 微生物乙酰乙酰輔酶A(AA-CoA)ELISA科研試劑盒 96T/48T
BS-0029-WB 微生物乙酰乙酰輔酶A(AA-CoA)ELISA科研試劑盒 96T/48T
?一、實(shí)驗(yàn)原理?
試劑盒采用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中乙酰乙酰輔酶A(AA-CoA)水平。用純化的乙酰乙酰輔酶A(AA-CoA)抗體包被微孔板，制成固相抗體，加入乙酰乙酰輔酶A(AA-CoA)，再與HRP標(biāo)記的乙酰乙酰輔酶A(AA-CoA)抗體結(jié)合，形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物。經(jīng)過(guò)洗滌后加底物TMB顯色，TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成黃色。顏色的深淺和樣品中的乙酰乙酰輔酶A(AA-CoA)呈正相關(guān)，用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD值)，通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中乙酰乙酰輔酶A(AA-CoA)濃度?。
?二、試劑盒組成?
試劑盒可能包括說(shuō)明書(shū)、封板膜、酶標(biāo)包被板、標(biāo)準(zhǔn)品、標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液、酶標(biāo)試劑、樣品稀釋液、顯色劑A液、顯色劑B液、終止液、濃縮洗滌液等?。
?三、操作步驟?
標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取，提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn)，可將標(biāo)本放于-20℃保存?。
設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔，加入不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品和待測(cè)樣本?。
加入HRP標(biāo)記的檢測(cè)抗體，封板后溫育?。
洗滌后加入底物顯色，再加入終止液終止反應(yīng)?。
在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD值)，通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中乙酰乙酰輔酶A(AA-CoA)濃度?。
?四、注意事項(xiàng)?
試劑盒保存在2-8℃，使用前室溫平衡20分鐘。從冰箱取出的濃縮洗滌液會(huì)有結(jié)晶，這屬于正常現(xiàn)象，水浴加熱使結(jié)晶溶解后再使用?。
實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回自封袋中，密封(低溫干燥)保存?。
嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)中標(biāo)明的時(shí)間、加液量及順序進(jìn)行溫育操作?。
所有液體組分使用前充分搖勻?。
請(qǐng)注意，由于不同品牌、不同批次的試劑盒可能存在差異，因此具體的使用說(shuō)明書(shū)應(yīng)以實(shí)際購(gòu)買的試劑盒附帶的說(shuō)明書(shū)為準(zhǔn)。此外，進(jìn)行實(shí)驗(yàn)時(shí)應(yīng)嚴(yán)格遵守實(shí)驗(yàn)室安全規(guī)范，確保實(shí)驗(yàn)人員的安全和實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性。
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