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ELISA與Western Blot實驗的區別
一、基本原理與核心差異
ELISA(酶聯免疫吸附試驗)?
基于抗原-抗體特異性結合，通過酶
標記信號放大(如HRP催化顯色)實現檢測，通常使用96孔聚苯乙烯酶標板作為固相載體?。
適用于溶液樣本(如血清、細胞培養上清)的定量分析，靈敏度高且可高通量操作?。
Western Blot(蛋白質免疫印跡)?
需先通過SDS-PAGE電泳分離蛋白質，再轉印至固相膜(如PVDF膜)，通過抗體結合和化學發光/顯色檢測目標蛋白?。
可提供蛋白質分子量信息，適用于定性或半定量分析，尤其適合研究翻譯后修飾?。
二、操作流程對比
步驟? ?ELISA? ?Western Blot?
樣本處理? 直接檢測液體樣本，無需電泳 需提取蛋白并電泳分離?
檢測方式? 酶標儀讀取吸光度(OD值) 化學發光/顯色成像系統?
耗時? 數小時(快速) 1-2天(復雜)?
三、應用場景選擇
ELISA優先?：
需高精度定量(如細胞因子濃度測定)?。
高通量篩選(如藥物開發中的抗體檢測)?。
Western Blot優先?：
需分析蛋白質分子量或翻譯后修飾?。
驗證蛋白質表達水平(如基因敲除效果)?。
四、技術局限性
ELISA?：無法區分蛋白質亞型或修飾，依賴抗體特異性?。
Western Blot?：定量誤差較大，操作復雜且通量低?。
五、總結
ELISA與Western Blot雖均基于免疫反應，但ELISA以定量見長，Western Blot以定性分析為優，選擇時需結合實驗目的(定量/定性)、樣本類型及設備條件綜合判斷?。
注：僅供科研使用，以上資料供參考，如需具體產品說明請咨詢技術老師或品牌供應商。
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