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ELISA避免“花板"出現(xiàn)的措施之陰陽性對(duì)照的選擇
ELISA實(shí)驗(yàn)是一種靈敏度高，特異性強(qiáng)，重復(fù)性好的實(shí)驗(yàn)診斷方法，ELISA實(shí)驗(yàn)中有很多因素影響著實(shí)驗(yàn)結(jié)果，導(dǎo)致出現(xiàn)“花板"問題。為了避免“花板"問題的出現(xiàn)，降低檢測(cè)的假陽性率，獲得更理想的實(shí)驗(yàn)結(jié)果，BUNSEN本生技術(shù)小編建議：先我們?cè)谶x擇ELISA試劑時(shí)，應(yīng)選擇靈敏度高、特異性好、穩(wěn)定性好、批間差小、價(jià)格操作方便、省時(shí)的試劑。并在檢驗(yàn)的過程中應(yīng)采取下列措施:
(1)檢測(cè)之前，加大離心轉(zhuǎn)速，盡量延長(zhǎng)時(shí)間，使血細(xì)胞和纖維蛋白充分沉淀，讓血細(xì)胞與血清分離。
(2)抽取樣本時(shí)應(yīng)抽出足夠檢驗(yàn)量的血液標(biāo)本，選擇無添加劑的真空試管。
(3)血液標(biāo)本應(yīng)置于室溫下1～2h，使血液凝固收縮，然后離心檢測(cè)或讓血液過夜后再檢測(cè)。這樣才能使得血液充分收縮，讓標(biāo)本中的非特異性物質(zhì)所致的假陽性率降至低。
(4)加樣時(shí)不能加入紅細(xì)胞或纖維蛋白，要按照操作說明書去做，否則會(huì)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
(5)封板溫育時(shí)，各孔一定要封嚴(yán)，防止陽性標(biāo)本的液體蒸發(fā)，產(chǎn)生周邊現(xiàn)象從而導(dǎo)致“花板"的出現(xiàn)。
(6)手工洗板時(shí)應(yīng)注意液體被濺出或孔與孔之間的液體溢出，連成整體液面后產(chǎn)生“花板"。
(7)洗液的溫度也會(huì)影響洗板的干凈程度，尤其是冬天溫度過低時(shí)容易出現(xiàn)“花板"問題。
(8)用洗板機(jī)洗板時(shí)應(yīng)防止針口有纖維蛋白或異物，這些異物在洗板的過程中易產(chǎn)生拖帶現(xiàn)象而導(dǎo)致“花板"的出現(xiàn)。
Elisa試劑盒之陰陽性對(duì)照的選擇：
做ELSIA實(shí)驗(yàn)時(shí)，會(huì)遇到很多問題，ELISA實(shí)驗(yàn)中最常見問題的就是陰陽性對(duì)照應(yīng)該如何選擇。
1、如何選擇合適的陽性對(duì)照?
陽性對(duì)照的基本組成應(yīng)該盡量與檢測(cè)樣本的組成一致，一般陽性對(duì)照多以含蛋白保護(hù)劑的緩沖液為基質(zhì)，加入一定量的待檢物質(zhì)。比如，以人血清為標(biāo)本的測(cè)定，陽性對(duì)照多用確定的病人血清或者以復(fù)鈣人血漿為原料加入一定量標(biāo)準(zhǔn)品。
2、如何選擇合適的陰性對(duì)照?
陰性對(duì)照的基本組成也應(yīng)該盡量與檢測(cè)樣本的組成一致，先檢測(cè)確定其中不含待檢物質(zhì)。比如，檢測(cè)人血清標(biāo)本時(shí)，陰性對(duì)照應(yīng)該選擇正常人血清。檢測(cè)免疫動(dòng)物血清中抗體效價(jià)時(shí)，陰性對(duì)照應(yīng)該選擇該動(dòng)物的免疫前血清。
ELISA試劑盒本生一直視質(zhì)量控制為企業(yè)的生命，追求企業(yè)競(jìng)爭(zhēng)力的不斷提升。公司在經(jīng)營(yíng)中始終秉承：遵紀(jì)守法，嚴(yán)于律己，寬仁以待，敢于承擔(dān)的企業(yè)精神作為標(biāo)準(zhǔn)，以過硬的質(zhì)量和優(yōu)良的服務(wù)來維護(hù)和拓展市場(chǎng)，較大限度的滿足客戶的需求。與客戶的共贏，是我們的發(fā)展目標(biāo)。本生!您信任的合作伙伴。我們?cè)概c您真誠(chéng)合作，共創(chuàng)美好的未來。
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